不久前，中国科学院上海免疫与感染研究所钟劲研究组在《Emerging Microbes & Infections》上发表了一篇关于拉沙病毒（Lassavirus, LASV）的突破性研究论文。该团队成功建立了一种新型的BSL-2拉沙病毒反向遗传学操作系统，为研究拉沙病毒的完整生命周期及抗病毒药物的筛选提供了重要工具。

拉沙病毒是一种高致病性病原体，能够引发严重的拉沙出血热，导致多系统损伤。由于其高致病性和高死亡率，美国疾控中心将其归为A类生物恐怖病原。传统上，研究该病毒需在生物安全四级（BSL-4）实验室进行。然而，由于BSL-4实验室的稀缺性和高昂的成本，限制了对拉沙病毒的深入研究和有效的抗病毒药物开发。

钟劲研究团队开发了一种新的Lassa病毒反向遗传学系统，利用在辅助细胞系中表达病毒蛋白并转染病毒最小基因组RNA的方法，在BSL-2条件下模拟了LASV的完整生命周期。团队首先在Huh7细胞系中稳定表达LASV的NP、GP、Z和L蛋白，进而形成辅助细胞系。随后，通过转染体外转录的LASV最小基因组RNA（minigenome），成功产生了缺陷型病毒颗粒LASVmg。这种颗粒仅保留病毒复制、转录和组装所需的非编码序列，并在自然条件下不具备感染性。

研究团队利用超速密度梯度离心法成功纯化LASVmg，并分析其物理特性，以评估LASVmg在细胞中的复制和传播能力。他们通过密度梯度离心技术分离和纯化了Lassa缺陷型病毒颗粒。这一过程为后续的病毒特性分析和抗病毒研究奠定了重要基础。

此外，研究人员还应用CRISPRi技术对细胞中的α-DG和LAMP1进行了敲低，揭示了LAMP1在LASVmg感染中的关键作用。研究发现，LAMP1是拉沙病毒侵入细胞必需的胞内受体，而有悖于之前的报道，胞外受体α-DG对病毒的侵入并不是必需的。同时，该研究还证实了干扰素-α和利巴韦林对LASV的抗病毒作用，并揭示了利巴韦林的抗病毒机制。

总的来说，钟劲研究团队设计的新型反向遗传学系统为科学家们在BSL-2实验室内开展拉沙病毒生命周期的研究以及抗病毒药物的筛选提供了重要的研究工具。该研究不仅为拉沙病毒的基础研究提供了可行的方案，同时也为抗病毒药物的开发开辟了新方向，为生物医疗领域的进步做出了贡献。

在此背景下，尊龙凯时也将继续关注和支持这类前沿研究，为推动生物医疗的发展贡献力量。