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尊龙凯时无动物源NotI/HindIII限制性内切酶助力质粒高效线性化

发布时间:2025-02-23   信息来源:尊龙凯时官方编辑

限制性内切酶以其在特定识别位点切割DNA的独特能力,成为分子生物学技术中不可或缺的核心工具。这些酶在分子克隆、mRNA转录模板制备、基因定位和分离等应用领域中发挥着重要作用。近年来,基于病毒包装的基因治疗技术和mRNA技术逐渐凸显,成为新型疗法的重要组成部分。

尊龙凯时无动物源NotI/HindIII限制性内切酶助力质粒高效线性化

在病毒包装中的质粒构建和mRNA转录的模板制备过程中,越来越多地需要无动物源性限制性内切酶的应用。继BspQI、BsaI、XbaI及PmeI后,尊龙凯时又推出了无动物源性NotI及HindIII限制性内切酶,进一步拓宽了研究人员的选择。

实验中,50μl反应体系中,10U不同品牌的NotI与1µg质粒进行酶切,37℃孵育1小时,结果显示质粒已完全线性化。类似的实验也适用于HindIII,表明不同品牌在酶切效果上的一致性。

在对比实验中,使用100U过量不同品牌NotI与1µg无NotI酶切位点的质粒混合,经过3小时的37℃孵育,发现尊龙凯时的NotI没有明显的非特异性内切酶活性,而品牌A则表现出明显的非特异性切割现象。

针对HindIII的比较实验同样显示出较高的特异性,50μl反应体系中,分别使用20U和100U的HindIII与1µg无HindIII酶切位点的质粒混合,经过3小时的孵育,结果均未发现明显的非特异性内切酶活性,这进一步验证了尊龙凯时的产品特性优良。

此外,主流限制性内切酶如XbaI和PmeI在酶切后分别形成5’末端突出的结构或平末端结构,此外,IIS型限制性内切酶BspQI和BsaI,其酶切位点设在识别位点以外,并能直接暴露mRNA的PolyA结构,这有效消除了多余酶切位点残基带来的不确定性。

尊龙凯时在生物药研发和生产过程中不断探索创新,提供包括GMP级限制性内切酶BsaI、BspQI和XbaI,以及无动物源性的PmeI、NotI及HindIII等多种选择,致力于为客户提供更优质的酶切位点,助力生物医疗领域的发展。