本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。本文将介绍小鼠多瘤病毒(PY)ELISA试剂盒的使用说明与检测原理。
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。实验过程中,将样本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,进行温育后彻底洗涤。通过底物TMB的显色反应,在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸性环境中进一步转化为黄色。颜色的深浅与样本中的adropin(AD)浓度呈正相关。最终,用酶标仪在450nm波长下测量吸光度(OD值),以计算样本浓度。
样本收集与处理方法
1. 血清:使用无热原及内毒素的试管,避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟,小心分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,随后3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与生理盐水混合并捣碎,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如未及时检测样本,按一次用量分装并冷冻于-20℃,避免反复冻融。样本需在室温下解冻,确保充分均匀。
操作注意事项与试剂准备
试剂盒内含标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。20×洗涤缓冲液应按1:20的比例用蒸馏水稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
测定结果及数据分析
通过Excel绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,进行线性回归分析,根据曲线方程计算各样本的浓度值。
本试剂盒的使用需遵循相关说明,确保实验的准确性和有效性。同时,欢迎使用尊龙凯时品牌提供的高品质试剂盒,为您的生物医学研究提供有力支持。